Спектрофотометр нь тухайн бодисын шингэсэн гэрлийн хэмжээг тооцоолох замаар тодорхой уусмал дахь ууссан бодисын концентрацийг хэмжих туршилтын арга юм. Энэ техник нь маш ашигтай байдаг, учир нь зарим нэгдлүүд нь янз бүрийн эрч хүчээр өөр өөр долгионы уртыг шингээдэг. Уусмалаар дамжин өнгөрөх гэрэлд дүн шинжилгээ хийснээр та уусмалд ууссан нэгдлүүд болон тэдгээрийн концентрацийг тодорхойлж болно. Энэхүү техникээр шийдлийг лабораторид шинжлэхэд ашигладаг хэрэгсэл бол спектрофотометр юм.
Алхам
3 -р хэсгийн 1: Дээжийг бэлтгэх
Алхам 1. Спектрофотометрийг асаана уу
Ихэнх спектрофотометрийг нарийвчлалтай хэмжихийн өмнө дулаацуулах шаардлагатай байдаг. Тиймээс машиныг асаагаад дээжийг хэмжихээс өмнө дор хаяж 15 минут байлгана.
Энэ хугацааг ашиглан дээж бэлтгэ
Алхам 2. Кювет эсвэл туршилтын хоолойг цэвэрлэнэ
Сургуулийн лабораторид эхлээд цэвэрлэх шаардлагагүй нэг удаагийн туршилтын хоолой байж болно. Гэсэн хэдий ч хэрэв та ердийн кювет эсвэл туршилтын хоолой ашиглаж байгаа бол төхөөрөмжийг ашиглахаасаа өмнө сайтар цэвэрлэж байгаарай. Бүх кюветийг ионгүйжүүлсэн усаар зайлна.
- Кювет ашиглах нь маш үнэтэй тул болгоомжтой байгаарай.
- Кювет ашиглаж байхдаа гэрэл өнгөрөх тал руу бүү хүр (ихэвчлэн савны тунгалаг тал).
Алхам 3. Кюветэд хангалттай хэмжээний дээж хийнэ
Кюветийн нэг хэсгийн хамгийн их эзэлхүүн нь 1 мл, харин туршилтын хоолойн дээд хэмжээ нь 5 мл байна. Спектрофотометрийн гэрэл нь дээжээр дамжин өнгөрч, савны хоосон хэсэг биш байхад таны хэмжилт үнэн зөв байх ёстой.
Хэрэв та дээж оруулахын тулд пипетк ашиглаж байгаа бол дээж бүрийн хувьд шинэ үзүүр ашиглана уу. Ингэснээр хөндлөн халдвараас зайлсхийх боломжтой
Алхам 4. Хяналтын шийдлийг бэлтгэ
Хоосон эсвэл хоосон гэж нэрлэгддэг эдгээр уусмалууд нь зөвхөн шинжилж буй уусмал дахь уусгагчийг агуулдаг. Жишээлбэл, хэрэв та давсны дээжийг усанд уусгасан бол танд хэрэгтэй хоосон уусмал бол ус юм. Хэрэв таны хэрэглэж буй ус улаан байвал та мөн улаан хоосон уусмал ашиглах хэрэгтэй. Хоосон уусмалыг дээжтэй ижил хэмжээтэй байлгахын тулд ижил төстэй савыг ашиглана уу.
Алхам 5. Кюветийн гадна талыг арчина
Кюветийг спектрофотометрт оруулахаасаа өмнө тоосны тоосонцор, хольцоос болж хэмжилт хийхэд саад учруулахгүйн тулд цэвэрхэн байх ёстой. Кюветийн гадна талд наалдсан усны дусал, тоосыг хөвөнгүй даавуугаар арилга.
3 -ийн 2 -р хэсэг: Туршилт хийх
Алхам 1. Дээжийг шинжлэхийн тулд гэрлийн долгионы уртыг тодорхойлж, тохируулна уу
Хэмжлийн үр нөлөөг нэмэгдүүлэхийн тулд нэг долгионы урттай гэрлийг (монохромат туяа) ашиглана уу. Туршилтын дээжинд ууссан гэж бодож байгаа химийн найрлагад шингэх гэрлийн өнгийг сонгоно уу. Ашиглаж буй спектрофотометрийн техникийн дагуу долгионы уртыг тохируулна уу.
- Сургуулийн лабораторид эдгээр долгионы уртыг ихэвчлэн туршилтын зааварт өгдөг.
- Дээж нь бүх харагдах гэрлийг тусгах тул туршилтын гэрлийн өнгөний долгионы урт нь дээжийн өнгөнөөс үргэлж ялгаатай байдаг.
- Тодорхой долгионы уртыг тусгаж, бусад бүх өнгийг шингээдэг тул объект тодорхой өнгөөр харагддаг. Хлорофилл нь ногоон өнгө тусгаж, бусад өнгийг шингээдэг тул өвс ногоон өнгөтэй болдог.
Алхам 2. Спектрофотометрийг хоосон уусмалаар тохируулна
Хоосон уусмалыг кюветийн саванд хийж спектрофотометрийг хаа. Аналог спектрофотометрийн дэлгэц дээр гэрэл илрүүлэх эрч хүч дээр үндэслэн хөдөлдөг зүү байдаг. Хоосон уусмал оруулсны дараа зүү баруун тийш шилжих ёстой. Энэ утгыг дараа нь танд хэрэгтэй бол тэмдэглээрэй. Хоосон уусмалыг спектрофотометрт байлгахыг зөвшөөрч, тохируулах товчлуурыг ашиглан зүүг тэг рүү гулсуулна уу.
- Дижитал спектрофотометрийг мөн ижил аргаар тохируулж болно. Гэсэн хэдий ч энэ хэрэгсэл нь дижитал дэлгэцээр тоноглогдсон болно. Хоосон шийдлийн уншилтыг хяналтын товчлуураар 0 болгож тохируулна уу.
- Хоосон уусмалыг спектрофотометрээс хассан ч шалгалт тохируулга хүчинтэй хэвээр байх болно. Тиймээс, та дээжийг бүхэлд нь хэмжихэд хоосон зайг шингээх чадвар автоматаар буурах болно.
Алхам 3. Хоосон зайг аваад спектрофотометрийн шалгалт тохируулгын үр дүнг туршина уу
Хоосон уусмалыг спектрофотометрээс гаргасны дараа ч гэсэн дэлгэц дээрх зүү эсвэл дугаар 0 гэсэн утгатай хэвээр байх ёстой. Хоосон уусмалыг спектрофотометрт буцааж хийж, уншилт нь өөрчлөгдөөгүй эсэхийг шалгаарай. Хэрэв хоосон уусмал ашиглан спектрофотометрийг зөв тохируулсан бол дэлгэц дээрх үр дүн 0 хэвээр байх ёстой.
- Хэрэв дэлгэц дээрх зүү эсвэл дугаар 0 -ийг уншихгүй бол шалгалт тохируулгын алхмыг хоосон уусмалаар давтана уу.
- Асуудал арилахгүй байвал тусламж хүсэх эсвэл спектрофотометрийг шалгах хүнтэй холбоо бариарай.
Алхам 4. Дээжийн шингээлтийг хэмжинэ
Хоосон уусмалыг аваад дээжийг спектрофотометрт оруулна. Гар тогтворжих эсвэл дижитал дэлгэц дээрх тоонууд өөрчлөгдөхөө болих хүртэл 10 секунд хүлээнэ үү. Дээжийн дамжуулалт ба шингээлтийн хувь хэмжээг тэмдэглэнэ үү.
- Илүү их гэрэл дамжих тусам гэрэл шингэх чадвар буурдаг. Ихэвчлэн дээжийн шингээлтийн утгыг ерөнхийдөө аравтын бутархай тоогоор илэрхийлэх ёстой, жишээ нь 0.43.
- Дээж тус бүрийн хэмжилтийг дор хаяж гурван удаа давтаж, дараа нь дундажийг тооцоолно. Ингэснээр таны авсан үр дүн илүү нарийвчлалтай байх болно.
Алхам 5. Гэрлийн янз бүрийн долгионы урттай туршилтыг давт
Таны дээж нь гэрлийн долгионы уртаас хамаарч өөр өөр шингээлттэй хэд хэдэн нэгдлүүдийг агуулсан байж болно. Тодорхой бус байдлыг багасгахын тулд гэрлийн спектрийн дагуу 25 нм долгионы урттай интервалтайгаар дээжийн хэмжилтийг давтана. Ингэснээр та дээжинд ууссан бусад химийн бодисыг илрүүлж чадна.
3 -р хэсгийн 3: Шингээлтийн өгөгдөлд дүн шинжилгээ хийх
Алхам 1. Дээжийн дамжуулалт ба шингээлтийг тооцоол
Дамжуулах чанар нь дээжээр хэр их гэрэл дамжиж, спектрофотометрт хүрч болохыг хэлнэ. Үүний зэрэгцээ шингээлт гэдэг нь дээжинд ууссан химийн бодисын аль нэгэнд хичнээн хэмжээний гэрэл шингэж байгааг хэлнэ. Орчин үеийн олон спектрофотометрүүд нь дамжуулалт ба шингээлт хэлбэрээр гаралт өгдөг. Гэсэн хэдий ч хэрэв та гэрлийн эрчмийн утгыг олж авбал эдгээр хоёр утгыг өөрөө тооцоолж болно.
- Дээжийн уусмалаар дамжин өнгөрөх гэрлийн эрчмийг хоосон уусмалаар дамжин өнгөрөх гэрлийн хэмжээгээр хувааж дамжуулалтыг (T) тодорхойлж болно. Энэ утгыг ихэвчлэн аравтын бутархай эсвэл хувиар илэрхийлдэг. T = I/I0, би бол түүврийн эрч хүч ба би0 хоосон эрч хүч юм.
- Шингээлт (A) -ийг сөрөг суурь 10 логарифм (экспонент) дамжуулалтаар илэрхийлнэ: A = -log10T. Тэгэхээр, хэрэв T = 0, 1, A = 1 (0, 1 бол -1 -ийн хүчээр 10). Энэ нь гэрлийн 10% нь өнгөрч байхад 90% нь шингэдэг гэсэн үг юм. Үүний зэрэгцээ, хэрэв T = 0.01 бол A = 2 (0.01 нь -2 -ийн 10 хүртэл байна). Энэ нь өнгөрөх гэрэл 0.1%байна гэсэн үг юм.
Алхам 2. Шингээлтийн утга ба долгионы уртыг графикаар зур
Шингээлтийн утгыг y тэнхлэг, долгионы уртыг x тэнхлэгээр илэрхийлнэ. Долгионы урт тус бүрийн шингээлтийн үр дүнгийн цэгүүдээс та дээжийн шингээлтийн спектрийг олж, нэгдлүүдийн агуулга, дээж дэх түүний харьцааг тодорхойлно.
Шингээлтийн спектр нь ихэвчлэн тодорхой долгионы урттай оргилуудтай байдаг. Эдгээр оргил долгионы урт нь тодорхой нэгдлүүдийг тодорхойлох боломжийг олгодог
Алхам 3. Өөрийн шингээлтийн спектрийг мэдэгдэж буй нэгдлийн графиктай харьцуулна уу
Найрлага бүр нь шингээлтийн өвөрмөц спектртэй бөгөөд хэмжилт бүрт үргэлж ижил оргил долгионы урттай байдаг. Та олж авсан графикийг тодорхой мэдэгдэж буй нэгдлийн графиктай харьцуулснаар дээж дэх уусмалын агууламжийг тодорхойлох боломжтой болно.
